本期来给大家介绍一下培养基和无菌水的制备方法,首先,我们来看一下培养基和无菌水的制备的基本原则。
1、 基本原则
培养基种类繁多,不同的微生物需要不同的培养基。培养基的物理状态可分为液体、固体和半固体。目前,使用的培养基是制备生物试剂和纸张。
2、 装备
三角瓶、试管、烧杯、玻璃棒、天平、搪瓷杯、量筒、铝箔纸、角勺、杜氏小管、硅胶塞、电炉。
3、 培养基类型
营养琼脂培养基、乳糖胆盐发酵培养基、乳糖发酵培养基、曙红美兰琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基(添加抗生素)、平板计数琼脂、十二烷基硫酸胰蛋白酶冻肉汤、亮绿乳糖胆盐培养基、EC培养基、高盐夏科琼脂、三糖铁琼脂等。
4、 方法步骤
1.培养基的制备:
(1) 称重:按培养基配方称取适量药物于搪瓷杯中;
(2) 溶解:用量管测量所需水量,放在电炉上加热,边搅拌边搅拌,直至完全溶解,加热至沸腾,拔下电源,等待冷却;
(3) 重新包装:根据不同需要,趁热立即放入三角瓶或试管中。重新包装的三角形瓶子不宜超过一半。重新包装的试管通常为试管长度的1/5(取决于试管的尺寸)。乳糖胆盐发酵培养基等液体培养基的重新包装量约为10ml
(4) 塞住硅胶塞:装有培养基的试管应塞住硅胶塞,硅胶塞应松紧适度,紧贴管壁不留缝隙,约1/2的硅胶塞应塞进试管内,以过滤空气,避免杂菌侵入,并减缓培养基中水分的蒸发
(5) 包装:三角瓶的棉塞头用锡箔包裹,试管集中在试管篮中
2.无菌水的制备:
(1) 用10ml移液管测量9.2ml蒸馏水(稀释水),并将其放入试管中
(2) 使用100ml量筒测量95ml蒸馏水(稀释水),并将其放入150ml三角形瓶中。在三角瓶中放一点玻璃珠,以防沸腾
(3) 将240ml蒸馏水(稀释水)倒入250ml三角瓶中,塞住瓶塞,用牛皮纸包好,高压..后备用。